Сахара (кетозы и урановые кислоты)

1,3-Диоксинафталин (нафторезорцин)-трихлоруксусная кислота

Раствор для опрыскивания: 1 объем спиртового раствора нафторезорцина (0,2 г нафторезорцина в 100 мл этанола) перед употреблением смешивают с 1 объемом 20%-наго водного раствора трихлоруксусной кислоты.
Последующая обработка: для обнаружения кетоз нагревают 5-10 мин в сушильном шкафу при 100 -105°, для обнаружения урановых кислот нагревают I0-I5 мин во влажной атмосфере (водяная баня) при 70-80 ⁰C. Примечание. Окраске мешает присутствие коллидина и пиридина. Вместо нафторезорцина можно применять резорцин, орцин, флороглюцин или 1-нафтол; 1 объем трихлоруксусной кислоты можно заменить 0,1 частью ортофосфорной кислоты (d=1,7).

Сахара (аминосахара)

4-Диметиламинобензальдегид-ацетилацетон

Растворы для опрыскивания: 1) 0,5 мл смеси из а мл 50%-наго водного раствора КОН и 20 мл этанола непосредственно перед употреблением добавляют к 10 мл смеси из 0,5 мл ацетилацетона и 50 мл н-бутанола. 2) 1 г 4-диметиламинобензальдегида растворяют в 30 мл этанола. Раствор смешивают с 30 мл соляной кислоты (.1,1,9). Перед употреблением разбавляют 180 мл бутанола-1.
Проведение реакции: после опрыскивания раствором 1 пластинки нагревают 5 мин при 100, а после опрыскивания раствором 2 сушат. 5 мин при 90 ⁰C.

Сахара (дезоксисахара)

п-Нитроанилин - периодная кислота

Растворы для опрыскивания: 1) 1 объем насыщенного водного раствора метапериодата натрия разбавляют 2 объемами воды. 2) 4 объема 1% раствора п-нитроанилина в этаноле смешивают с 1 объемом соляной кислоты (1,19).Проведение реакции: после опрыскивания пластинки раствором 1 ждут 10 мин, затем опрыскивают раствором 2. Дезоксисахара и гликоли дают желтое сильно флуоресцирующее в УФ-свете пятно. При опрыскивании 5% метанольным раствором NaOH окраска переходит в зеленую.

Сахара, стероиды, терпены

Анисовый альдегид - серная кислота

Раствор для опрыскивания: свежеприготовленный раствор 0,5 мл анисового альдегида в 50 мл ледяной уксусной кислоты с добавкой 1 мл серной кислоты (1,84).
Последующая обработка: 5-10 мин нагревают при 100-110 °С. Розовый фон можно осветлить действием водяных паров (водяная баня).

(Вещества, содержащиеся в лишайниках, фенолы, терпены, сахара и стероиды окрашиваются, в зависимости от соединения, в фиолетовый, синий, красный, серый или зеленый цвет).
 

В а р и а н т ы :
а) Раствор для опрыскивания: 1 мл анисового альдегида вносят в 97 мл ледяной уксусной кислоты н к смеси добавляют 2 мл концентрированной серной кислоты. Последующая обработка: нагревают 6 мин при 120 °C.
б) 0,5 мл анисового альдегида растворяют в смеси 10 мл ледяной уксусной кислоты + 85 мл метанола и добавляют 5 мл концентрированной серной кислоты.

Для обнаружения производных терпена и др. около 10 мл этой смеси распыляют на пластинке 20Х20 см и нагревают приблизительно 10 мин при 100 °C.
в) Для обнаружения сахаров применяют свежеприготовленную смесь 0,5 мл анисового альдегида + 9 мл этанола (95%-ного) + 0,5 мл концентрированной серной кислоты + 0,1 мл ледяной уксусной кислоты. После опрыскивания пластинку нагревают 5-10 мин при 90-100 °C.

Сахара (дезоксисахара)

Нитропруссид натрия - периодат натрия

Растворы для опрыскивания: 1) Смесь 1 объема насыщенного водного раствора перйодата натрия и 2 объемов воды. 2) Смесь 1 объем насыщенного водного раствора нитропрусида натрия, 3 объемов воды и 20 объемов насыщенного раствора пиперазина в 96% этаноле.

Проведение реакции: опрыскивают раствором 1, 10 мин сушат при комнатной температуре и затем опрыскивают раствором 2.Примечание: Максимальная голубая окраска дезоксисахаров наблюдается спустя 10 мин. Чувствительность обнаружения повышается при замене раствора для опрыскивания II смесью 4 объемов 1% раствора п-нитроанилина в этаноле и 1 объема 36% соляной кислоты (желтое флуоресцирующее пятно в монохроматическом УФ-свете).

Сахара (кетозы)

Антроновый реактив

Раствор для опрыскивания: 0,3 г антрона растворяют в 10 мл ледяной уксусной кислоты и в раствор добавляют 20 мл 96%-ного этанола, 3 мл фосфорной кислоты (1,7) и 1 мл воды. Этот раствор устойчив в холодильнике в течение нескольких недель. Проведение реакции: после опрыскивания хроматограмму 5-6 мин нагревают до температуры 110 °C. Кетозы и кетозы, содержащие олигосахарнды, появляются в виде желтых пятен.

Сахара (кетозы)

Мочевина - соляная кислота

Раствор для опрыскивания: 5 г мочевины растворяют в 20 мл 2 ч. соляной кислоты. Раствор смешивают с 100 мл этанола. Кетозы и кетозы содержащие олигосахариды, приобретают синюю окраску. Непродолжительное нагревание способствует реакции.

Сахара и сахарные спирты

Нитрат серебра

Раствор для опрыскивания: 1 мл насыщенного водного раствора нитрата серебра при помешивании добавляют к 20 мл ацетона, а затем медленно по каплям прибавляют воду до полного растворения выпавшего нитрата серебра. Последующая обработка: пластинку помещают приблизительно на 15 мин в камеру, насыщенную аммиаком (в темноте) и сразу после этого нагревают при 80° до появления отчетливых темных пятен.

Сахара, барбитуровые кислоты и т. д.

Дифениламин -
4-сульфоновокислый барий

Раствор для опрыскивания: готовят насыщенный раствор (0,2%-ный дифениламиносульфоновокислого бария в метаноле. Последующая обработка: если после интенсивного опрыскивания пятно не флуоресцирует в УФ-свете (254 нм), пластинку греют 5-10 мин при 110 ⁰C.

Сахара восстановленные, стероиды, глюкозиды, тиокислоты.

2,3,5-Трифенилтетразолийхлорид

Раствор для опрыскивания: перед употреблением 1 объем 4% раствора ТФТХ. в метаноле смешивают с 1 объемом 1н. раствора NaOH в метаноле. Последующая обработка: нагревают 5-10 мин при 110 ⁰C. Каждый раз нагревают до появления отчетливых красных пятен, при этом фон остается практически бесцветным.

Восстановленные сахара

Анилин-фосфорная кислота

Раствор для опрыскивания: 1 объем 2 н. раствора анилина в насыщенном водой бутаноле-1 смешивают с 2 объемами 2 н. раствора ортофосфорной кислоты в бутаноле-1.Последующая обработка: хроматограмму нагревают 10 мин при 105 °C.

Восстановленные сахара

Анилинфталат

Раствор для опрыскивания: 0,93 г анилина и 1,66 г о-фталевой кислоты растворяют в 100 мл насыщенного водой бутанола-1. Последующая обработка: пропитанную хроматограмму нагревают 10 мин при 105 °C.

Кислоты, сахара и сахарные спирты

Бензидин - метапериодат натрия

Растворы для опрыскивания:

1) 0,1%-ный раствор метапериодата натрия.
2) К раствору 2,8 г бензидина в 80 мл 96°/о этанола добавляют 70 мл воды, 30 мл ацетона и 1,5 мл 1 н. соляной кислоты.Проведение реакции: после опрыскивания раствором 1 влажную хроматограмму опрыскивают раствором 2.