Обнаруживаемая группа

Реактив

Состав реактива и проведение обработки

Аминокислоты

2-Нафтохинон-4-сульфокислота (натриевая соль)

Раствор для опрыскивания: 0,2 г натриевой соли 2-нафтохино-4-сульфокислоты кастворяют в 100 мл 5% раствора карбоната натрия. Опрыскиваме следует проводить приблизительно через 10-15 мин после приготовления раствора для опрыскивания, без последующей обработки.

Аминокислоты (Аргинин и гуанидин)

1-Нафтол

Раствор для опрыскивания: 1) 0,1% раствор 1-нафтола в 1 н. КОН. 2) Смесь 100 мл 5% водного раствора NaOH и 2 мл брома. Проведение реакции: сначала опрыскивают раствором 1, затем раствором 2. При обнаружении стрептомицина рекомендуют вместо раствора 2 использовать смесь 50 мл водного раствора гипохлорита натрия (13% активного хлора) и 50 мл этанола.

Аминокислоты (оксиаминокислоты: серин, треонин, оксипролин)

Реактив Несслера

Растворы для опрыскивания: 1) 1%-ный водный раствор метапериодата натрия. 2) Реактив Несслера. Проведение реакции: опрыскивают раствором 1, затем хроматограмму высушивают при комнатной температуре и опрыскивают реактивом 2.

Аминокислоты и амины

Нингидриин

Раствор для опрыскивания: 0,3 г нингидрина растворяют в 100 мл н-бутанола и добавляют 3 мл ледяной уксусной кислоты.Последующая обработка: пластинку нагревают около 30 мин при 60 ⁰С или 10 мин при 110 ⁰С.
Чувствительность: от 0,1 нг для пролина до 0,001 нг для глицина.
Стабилизация окрашенного нингидрином пятна.
Раствор для опрыскивания: 1 мл насыщенного водного раствора нитрата меди с добавкой 0,2 мл 10%-ной азотной кислоты растворяют в 100 мл этилового спирта (96%).
Проведение реакции: на нингидриновое пятно напыляют раствор до максимально интенсивного окрашивания и помещают пластинку в закрытый сосуд, содержащий стакан с концентрированным аммиаком. Образующийся красный комплекс меди устойчив только в отсутствие свободных ионов водорода и сильных комплексообразователей.

Аминокислоты

Нингидрин - нитрат меди (полихроматический реактив)

Исходные растворы: 1) 0,1 г нингидрина растворяют в 50 мл абсолютного спирта и добавляют 100 мл ледяной уксусной кислоты и 2 мл 2,4,6-коллидина. 2) 0,5 г нитрата меди [Сu(NOз)2·3Н2O] растворяют в 50 мл абсолютного спирта.
Перед употреблением смешивают растворы 1 и 2 в отношении 50:3. Пластинки опрыскивают. Последующая обработка: хроматограмму нагревают 4 мин до 110 ⁰С и появившееся пятно сразу же отмечают, так как уже через 10 мин оно изменяется и бледнеет (чувствительность около 0,5-1 нг аминокислоты).

Аминокислоты (орнитин, лизин) и амины

Ванилин

Растворы для опрыскивания: 1) 2 ванилина растворяют в 100 мл н-пропанола.
2) 1°/о раствор КОН в спирте.
Проведение реакции: хроматограмму опрыскивают раствором 1 и 10 мин нагревают при 110° в сушильном шкафу. Орнитин дает яркую желто-зеленую флуоресценцию в монохроматическом УФ-свете, лизин - слабую желто-зеленую флуоресценцию. После опрыскивания раствором 2 еще раз нагревают. Орнитин сначала окрашивается в розовый цвет, а затем бледнеет, а протин, окснпролин, пипеколиновая кислота и саркозин через несколько часов окрашиваются в красный цвет, гликоколь становится сине-зеленым, остальные аминокислоты окрашиваются в светло-коричневый цвет.