ЖХ/МС/МС микропотоковая система Nexera Mikros на базе жидкостного хроматографа LC-40 Nexera и трехквадропульного ЖХ-МС/МС спектрометра LCMS 8060 Shimadzu может использоваться для обнаружения целевых компонентов в диапазоне от 100 до 500 мкл/мин с чувствительностью большей, чем в системах с полу-микропотоком.

Повышение чувствительности метода ЖХ / МС / МС обычно может быть достигнуто за счет уменьшения аналитического масштаба анализа. Однако значительное сокращение аналитического масштаба до нанопотока снижает производительность, стабильность и надежность в качестве компромисса для большей чувствительности. Nexera Mikros, микропоточная система ВЭЖХ / МС от Shimadzu, предлагает сбалансированное решение для повышения чувствительности с меньшим компромиссом в отношении пропускной способности и надежности, используя скорость потока от 1 до 500 мкл / мин и внутренний диаметр колонки от 0,1 до 1 мм. Он обеспечивает стабильный и точный количественный анализ за счет надежной подачи растворителя микропотоком, оптимизированной конструкции источника ионов, уникального соединения колонки UF-Link и разнообразия систем, поддерживающих широкий спектр приложений.

Система Nexera Mikros представлена в трех комплектах – в зависимости от решаемых задач.

Система прямого впрыска - Direct Injection System

Идеально подходит для анализов с ограниченным объемом пробы. Эта система обеспечивает быстрый и высокочувствительный анализ ЖХ / МС микропотоков без потери образца.

Система ловушки и элюирования - Trap and Elute System

Идеально подходит для анализов с большими объемами впрыска или когда желательна некоторая степень очистки образца.

Система подпитки потока Make-Up Flow System

Добавление насоса подпитки после колонки позволяет добавлять модификаторы подвижной фазы для обеспечения максимальной эффективности ионизации в источнике МС.

Улучшенные пределы обнаружения с помощью микропотока

Высокая биоаналитическая чувствительность

Чувствительность остается проблемой для многих метаболитов витамина D, таких как 1,25 (OH) 2 дигидроксивитамин D и 24,25 (OH) 2 дигидроксивитамин D, поскольку они не имеют легко ионизируемых функциональных групп и находятся в небольшом количестве. Как показано ниже, анализ микропотоковой ЖХ / МС / МС стандартных растворов вышеупомянутых аналитов витамина D привел к трех-пятикратному улучшению отношения сигнал / шум по сравнению с полумикропотоковым анализом.

Повышенная чувствительность, достигаемая с помощью ЖХ / МС / МС с микропотоком, по сравнению с полумикропотоком, привела к пятикратному увеличению отношения сигнал / шум для верапамила и четырехкратному увеличению отношения сигнал / шум у Верапамила. Нор-Верапамил.

Биоанализ моноклональных антител - Набор антител
Nexera ™ Mikros и nSMOL ™ BA -

nSMOL (протеолиз, ограниченный наноповерхностью и молекулярной ориентацией) - это запатентованный новаторский процесс, который обеспечивает селективный протеолиз Fab-фрагмента антител с использованием наночастиц, иммобилизованных трипсином. Пептиды, производные Fab, количественно определяют с помощью измерения MRM на высокочувствительном масс-спектрометре. Система Nexera Mikros обеспечивает интенсивность сигнала в 12 раз выше, чем при обычном расходе, с соответствующим нижним пределом обнаружения 0,025 мкг / мл и хорошей линейностью. Система Nexera Mikros идеально подходит для количественного определения пептидов на низком уровне с помощью ЖХМС.

Ниже приведен пример анализа лекарственных препаратов на антитела в плазме. Плазма с добавлением трастузумаба была предварительно обработана с использованием набора nSMOL Antibody BA Kit.
При анализе сигнатурных пептидов, полученных из трастузумаба, Nexera Mikros обеспечивает динамический диапазон 0,00763 - 62,5 мкг / мл, хорошую линейность с R2> 0,99 и превосходную точность 101,0% (средняя).

Воспроизводимость результатов этого анализа пептидов, производных трастузумаба, в течение дня суммирована в таблице ниже.

Эти результаты показывают отличную воспроизводимость с точностью и прецизионностью в пределах 20% при LLOQ и в пределах 15% даже при других концентрациях.

Несравненная прочность микропотока

Воспользуйтесь преимуществами микропотока, наслаждаясь прочностью и надежностью ВЭЖХ

Система Nexera Mikros обеспечивает улучшения, которые вы ожидаете от системы с низким расходом, с надежностью ВЭЖХ. Контрольный образец плазмы осаждали белком, разбавляли (3х) и вводили 1500 раз подряд. Во время последовательных инъекций образец QC (40 ppt нортриптилина) вводили один раз через каждые 50 инъекций холостого опыта плазмы. Площади пиков и время удерживания образца QC показаны ниже. При повторяемости площади 4,38% RSD и стабильности времени удерживания 0,25% RSD была продемонстрирована чрезвычайно стабильная работа без потери формы пиков, характерной для высокопроизводительных анализов сложных матриц.

* Результаты получены в условиях нашего приложения.

Надежный и простой в использовании источник микропотока ESI

Источники Micro-ESI ™

Источник ЖХМС Micro-ESI компании Shimadzu был разработан для обеспечения оптимальной чувствительности и простоты использования. Регулируемый по оси X – Y столик и камера наблюдения позволяют легко регулировать распылительную иглу ESI. Термостат колонки установлен на ЖХМС, чтобы минимизировать объем между выходом из колонки и иглой ESI.
Зонд Micro-ESI также имеет угол распыления ESI, оптимизированный для скорости микропотоков, и доступен для масс-спектрометрии с тройным квадруполем с масс-детектированием и квадрупольной времяпролетной масс-спектрометрии соответственно.

CTO-Mikros ™ + UF-Link ™: простая и надежная установка колонки

К источнику Micro-ESI прикреплен термостат колонок CTO-Mikros. Обеспечивается стабильная температура колонки, необходимая для воспроизводимости времени удерживания, и могут использоваться колонки длиной до 150 мм. Чтобы сохранить оптимальную настройку источника, CTO-Mikros оснащен инновационной защелкивающейся системой фиксации хроматографической колонки UF-Link.

При использовании микропотока даже самый маленький мертвый объем может вызвать значительную диффузию и привести к потере формы пика и чувствительности. 

UF-Link от Shimadzu позволяет любому пользователю правильно установить колонку микропотока, не нарушая положения иглы распылителя ESI. Адаптер с надежной герметизацией позволяет колонке зафиксироваться в термостате и обеспечить соединение с иглой ESI с нулевым мертвым объемом. Возможна установка любой колонки длиной до 150 мм со стандартной арматурой.

Порядок подключения

Присоедините переходник к колонке.
Стандартная резьба на адаптере делает
его совместимым с широким спектром
колонн.

Поместите колонку в
механизм UF-Link внутри термостата колонок.

Завершите соединение,
перекинув рычаг.

LC-Mikros ™: инновационная конструкция микропоточного насоса

Насосы Shimadzu LC являются отраслевым стандартом для длительного срока службы и высокой производительности. Насос для подачи растворителя LC-Mikros имеет совершенно новую конструкцию с прямым приводом для обеспечения скорости потока от микро до полумикро в диапазоне от 1 до 500 мкл / мин. Допуск давления в системе УВЭЖХ 80 МПа (11 600 фунтов на кв. Дюйм) позволяет использовать колонки любого типа.

Насос LC-Mikros разработан для микропоточного градиентного элюирования даже при низких процентных концентрациях. В приведенном ниже примере показана превосходная градиентная стабильность при использовании композиций подвижной фазы в диапазоне от 1% до 90%. LC-Mikros обеспечивает стабильное время удерживания, необходимое для хроматографа.

Скорость потока: 5 мкл / мин.
Колонка: Shim-pack MC C18 (внутренний диаметр 0,3 мм × 150 мм)
* Получено в указанных нами условиях.

SIL-40C XR: Автосэмплер с прямым впрыском малых объемов

Автосэмплер SIL-40C XR обеспечивает превосходную точность и воспроизводимость, а также чрезвычайно низкий переходящий остаток. Его объем впрыска составляет от 0,1 до 50 мкл, и ваш драгоценный образец никогда не будет потрачен впустую благодаря адаптированному методу полного впрыска SIL-40C XR. 

Это способствует получению высокоточных результатов, даже если вам пришлось использовать небольшой объем впрыска (менее 1 мкл). В случае микропотока с узкой колонкой оптимальный объем впрыска также снижается. Также трудно увеличить объем впрыска, особенно если вы будете использовать растворитель для пробы с высокой элюирующей способностью. В этом случае образец необходимо разбавить. 

Возможность высокоточного впрыска микрообъемов SIL-40C XR позволяет использовать образцы с высоким содержанием органических растворителей без разбавления.

Объем системы и задержка градиента сводятся к минимуму с помощью недавно разработанного «программируемого механизма отключения петли», который автоматически отводит петлю пробы от выкидной линии с помощью клапана высокого давления, как только проба сливается из иглы. Это чрезвычайно важно для минимизации времени выполнения анализа микропотоков.

Материалы для скачивания

Nexera Mikros листовка

Семейство жидкостных хромато-масс спектрометров Shimadzu (Брошюра, англ.)

Методики и ГОСТЫ для жидкостной хромато-масс-спектрометрии

Методики и рекомендации Shimadzu

Сборник статей для фармацевтических анализов