Гели и буферы для электрофореза белков
В данном разделе представлены реагенты и расходные материалы MERCK для проведения электрофореза белков, вестерн-блоттинга и подобных технологий.
Корпорация MERCK предлагает гелевые реагенты для ручного литья, готовые гели и рабочие буферные порошки.
ТОО Лаборфарма является диллером корпорации MERCK на территории Казахстана.
Электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ) - основополагающий метод, используемый для разделения белков и других макромолекул по их электрофоретической подвижности.
Полиакриламидные гели состоят из двух частей: накопительной части и рассасывающейся части. Укладочная часть геля представляет собой низкопроцентный акриламид, который служит для концентрации образцов в одну полосу перед попаданием в разделяющий гель. Рассасывающийся гель представляет собой акриламид с более высоким процентом содержания, который разделяет белки по размеру.
Полиакриламидные гели образуются путем полимеризации мономеров акриламида и сшивающих молекул бис-акриламида. Вместе акриламид и бис-акриламид образуют поры, через которые могут мигрировать белки. Концентрация акриламида линейно зависит от размера пор; более высокая концентрация акриламида приведет к уменьшению пор внутри геля. Мелкие поры желательны для разделения низкомолекулярных белков.
Процент акриламида в геле влияет на разрешение белковых полос: более высокий процент акриламида полезен для разделения белков с низкой молекулярной массой, а более низкий процент акриламида полезен для разделения белков с более высокой молекулярной массой.
ПААГ гели можно отливать вручную или приобретать в виде готовых гелей.
Градиентные готовые гели охватывают более широкий диапазон размеров молекулярной массы.
Хотя готовые полиакриламидные гели можно приобрести для специализированных целей, например, для анализа белков разного размера по градиенту акриламида, многие исследователи предпочитают отливать свои собственные полиакриламидные гели вручную. Полиакриламидные гели, отлитые вручную, стоят дешевле по сравнению со сборными гелями; однако подготовка реагентов и оборудования для литья может быть утомительной и трудоемкой. Изменения в приготовлении гелевого буфера также могут привести к нестабильным характеристикам и качеству геля.